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凝膠凈化定量濃縮系統(tǒng)的工作原理
凝膠凈化定量濃縮系統(tǒng)的工作原理
更新時(shí)間:2024-09-11 | 點(diǎn)擊率:112
凝膠凈化定量濃縮系統(tǒng)是一種用于分離和定量大分子化合物的液相色譜技術(shù)。它主要基于樣品分子在多孔凝膠中的滲透性差異來實(shí)現(xiàn)分離。以下是
凝膠凈化定量濃縮系統(tǒng)
工作原理的詳細(xì)解釋:
1、固定相:GPC的固定相是由多孔凝膠珠組成的,這些珠子具有不同的孔徑大小。當(dāng)樣品溶液通過這些珠子時(shí),大分子由于體積較大,不能進(jìn)入小孔,因此沿較短的路徑流動;而小分子可以進(jìn)入大部分或所有的孔,因此在柱中停留的時(shí)間更長。
2、移動相:移動相是液體溶劑,如四氫呋喃、二甲基甲酰胺或其他有機(jī)溶劑,用于推動樣品通過固定相。
3、分離機(jī)制:當(dāng)樣品注入到GPC柱中時(shí),大分子首先被洗脫出來,因?yàn)樗鼈冄刂^短的路徑流動。隨后,較小的分子逐漸被洗脫,因?yàn)樗鼈冊谥械穆窂捷^長。這樣,樣品中的分子按照其大小被分離。
4、檢測器:洗脫出的分子通常通過某種形式的檢測器進(jìn)行檢測,如紫外-可見光譜檢測器、折射率檢測器或其他類型的檢測器。檢測器產(chǎn)生的信號與洗脫出的分子濃度成正比,從而允許對樣品中的組分進(jìn)行定量分析。
5、數(shù)據(jù)解析:通過比較已知分子量的標(biāo)品與樣品的洗脫時(shí)間,可以生成一個校準(zhǔn)曲線。使用這個曲線,可以確定未知樣品中各組分的分子量。
6、濃縮系統(tǒng):在某些應(yīng)用中,可能需要對洗脫出的組分進(jìn)行濃縮,以便進(jìn)一步的分析或使用。這通常通過蒸發(fā)溶劑來實(shí)現(xiàn),有時(shí)結(jié)合低溫來防止熱敏感樣品的降解。
總的來說,凝膠凈化定量濃縮系統(tǒng)利用了分子大小的差異來實(shí)現(xiàn)分離,并結(jié)合了檢測和數(shù)據(jù)處理技術(shù)來進(jìn)行定量分析。這種技術(shù)廣泛應(yīng)用于聚合物科學(xué)、生物化學(xué)和其他領(lǐng)域中,用于分析大分子的大小、分布和純度。
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